制备单克隆抗体的2个原理

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/13 08:13:41
制备单克隆抗体的2个原理

制备单克隆抗体的2个原理
制备单克隆抗体的2个原理

制备单克隆抗体的2个原理
抗体主要由机体的B淋巴细胞合成,每个B淋巴细胞有合成一种抗体的遗传基因.当机体受抗原刺激时,抗原分子上的许多决定簇分别激活各个具有不同基因的B细胞.被激活的B细胞分裂增殖形成该细胞的子孙,即克隆.如果选出一个合成一种抗体的细胞进行培养,就可得到由单细胞经分裂增殖而形成细胞群,即单克隆.单克隆细胞所合成的抗体即为单克隆抗体.

1、动物细胞融合
2、动物细胞培养
这就是制备单抗的原理。

将淋巴B细胞与骨髓瘤细胞动物细胞融合,
然后组织培养,进过至少两次筛选获得单克隆抗体。
也就是说,动物细胞融合,动物细胞培养。

二、实验原理: 骨髓瘤细胞在体外培养能大量无限增殖,但不能分泌特异性抗体;而抗原免疫的B淋巴细胞能产生特异性抗体,但在体外不能无限增殖。将免疫脾细胞与骨髓瘤细胞融合后形成的杂交瘤细胞,继承了两个亲代细胞的特性,既具有骨髓瘤细胞能无限制增殖的特性,又具有免疫B细胞合成和分泌特异性抗体的能力。经在HAT培养基[含有次黄嘌呤(H)、氨基喋呤(A)和胸腺嘧啶核苷(T)]中进行选择性培养,未融合的脾细胞...

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二、实验原理: 骨髓瘤细胞在体外培养能大量无限增殖,但不能分泌特异性抗体;而抗原免疫的B淋巴细胞能产生特异性抗体,但在体外不能无限增殖。将免疫脾细胞与骨髓瘤细胞融合后形成的杂交瘤细胞,继承了两个亲代细胞的特性,既具有骨髓瘤细胞能无限制增殖的特性,又具有免疫B细胞合成和分泌特异性抗体的能力。经在HAT培养基[含有次黄嘌呤(H)、氨基喋呤(A)和胸腺嘧啶核苷(T)]中进行选择性培养,未融合的脾细胞因不能在体外长期存活而死亡;未融合的骨髓瘤细胞合成DNA的主要途径被培养基中的氨基蝶呤阻断,又因缺乏次黄嘌呤-鸟嘌呤-磷酸核糖转移酶(HGPRT),不能利用培养基中的次黄嘌呤完成DNA的合成过程而死亡。只有融合的杂交瘤细胞由于从脾细胞获得了次黄嘌呤-鸟嘌呤-磷酸核糖转移酶,因此能在HAT培养基中存活和增殖。经过克隆选择,可筛选出能产生特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞,在体内或体外培养,即可无限制地大量制备单克隆抗体。

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大家不要随便在网上找一段粘上就OK了 多替出题人想想
我把我笔记中精华处给你写上
原理 1动物细胞融合 (杂交瘤细胞与B细胞融合)
2细胞增殖 (要么体外培养 要么注入腹水)
再给你加个重点 两次筛选方法与作用
1单孔培养发 (选出杂交瘤细胞)
2选择性培养基 (选出能分泌特定抗体的杂交瘤细胞)
希望对你有用...

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大家不要随便在网上找一段粘上就OK了 多替出题人想想
我把我笔记中精华处给你写上
原理 1动物细胞融合 (杂交瘤细胞与B细胞融合)
2细胞增殖 (要么体外培养 要么注入腹水)
再给你加个重点 两次筛选方法与作用
1单孔培养发 (选出杂交瘤细胞)
2选择性培养基 (选出能分泌特定抗体的杂交瘤细胞)
希望对你有用

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标答:1.动物细胞融合 2.细胞的分裂分化
5楼请注意,你说的细胞增殖这是矛盾的,增殖是对于病毒而言的,而病毒根本没有细胞结构何谈细胞增殖一说呢?