定量PCR重复性问题我做定量PCR有一段时间了,但经常会出现相同的模板,不同反应板出来的结果出现较大差异.开始我认为可能是反复冻融造成cDNA的降解,但将cDNA分装后还是会出现这种现象.由于

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/05 06:44:45
定量PCR重复性问题我做定量PCR有一段时间了,但经常会出现相同的模板,不同反应板出来的结果出现较大差异.开始我认为可能是反复冻融造成cDNA的降解,但将cDNA分装后还是会出现这种现象.由于

定量PCR重复性问题我做定量PCR有一段时间了,但经常会出现相同的模板,不同反应板出来的结果出现较大差异.开始我认为可能是反复冻融造成cDNA的降解,但将cDNA分装后还是会出现这种现象.由于
定量PCR重复性问题
我做定量PCR有一段时间了,但经常会出现相同的模板,不同反应板出来的结果出现较大差异.开始我认为可能是反复冻融造成cDNA的降解,但将cDNA分装后还是会出现这种现象.由于同一个反应板上,一个基因的重复孔之间的重复性都很好,所以我想应该不是加样的问题.
我用的模板是从细胞中提取的总RNA经DNA酶处理除去DNA后,经逆转录得到的cDNA;检测的目的基因是线粒体基因.
电泳检测RNA没有降解

定量PCR重复性问题我做定量PCR有一段时间了,但经常会出现相同的模板,不同反应板出来的结果出现较大差异.开始我认为可能是反复冻融造成cDNA的降解,但将cDNA分装后还是会出现这种现象.由于
线粒体基因是问题所在
每个细胞的线粒体数目是不同的,所以RNA总量不能代表样本的量.你必须用另外一个线粒体RNA做内参才行