菌落pcr假阳性最后一道在1kb处隐约可见条带,是假阳性吗?mark呈直线,而各个条带两端上扬,是什么原因

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/02 12:06:44
菌落pcr假阳性最后一道在1kb处隐约可见条带,是假阳性吗?mark呈直线,而各个条带两端上扬,是什么原因

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菌落pcr假阳性
最后一道在1kb处隐约可见条带,是假阳性吗?mark呈直线,而各个条带两端上扬,是什么原因

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条带两端上扬这种情况在跑电泳很常见,一般把电压调低点跑久点会改善,有时候胶没有做好也会出现这样的情况,注意拔梳子的时候一定要平衡.以前做克隆的时候,阴性对照模板用水扩增也出现过有条带,就像你最后一个泳道.老板说是污染了,把所有的试剂全部换新的,而且加样条件也非常注意,后来就没有条带了.

多半是的吧。。。可能电压大了点儿。没关系的。

菌落pcr假阳性最后一道在1kb处隐约可见条带,是假阳性吗?mark呈直线,而各个条带两端上扬,是什么原因 菌落pcr假阳性如图,菌落pcr,2-6道扩增0.9kb目的条带,7-12扩增1.0kb目的条带.7,8道扩增的1.0kb有点偏离,9道为非特异性扩增,12道在1.0kb位置有隐约条带,是否为非特异性扩增?mark跑直线,而条带两端上扬 什么是菌落pcr假阳性 菌落PCR怎么做有人用菌落做过PCR吗,假阳性高吗,效果怎么样啊 革兰氏阳性菌菌落PCR问题我最近也在做菌落PCR验证,我是直接挑单菌落进行PCR验证的,但是电泳不出现条带,胶孔里有明亮物质,100bp处有很多模糊的亮色物,我是一个新手,还望您指教一下,我这种 重组质粒转化大肠杆菌,几乎全是假阳性.挑了26个菌做菌落PCR只有3个阳性克隆.为什么假阳性那么多呢?会不会是感受态在-70度放得时间长了,不好用了.还是没有酶切好?用的是BamH I和Hind Ⅲ限制 革兰氏阳性菌PCR革兰氏阳性菌如何做菌落PCR?煮20 min后,还是不能P出目的条带. 关于菌落pcr我的做法是: 用枪头挑选单菌落到装有10uL水的pcr管中,然后悬浮菌液. 在做 PCR 时,吸取 2uL 做摸板,但电泳检测后,选有阳性克隆相对的菌液 8uL 与试管的液体培养基中培养.这样做, 菌落PCR原理 菌落PCR阳性,目的片段2300bp,假阴性可能性很小,但是我取菌涂板子后,竟然没长出来,这是不是说明质粒跑到菌液去了?取菌扩大培养又可以明显看到菌扩增了? 重组质粒双酶切带与PCR扩增带大小不一PCR扩增出1kb的带,双酶切(3h)切出的是2kb的带,和载体相比,切出的带不亮,有的根本看不清,可能是目的片段不浓,如果是质粒不纯,我是从单菌落来 kb cDNA CTK PCR 菌落PCR技术鉴定阳性重组菌落PCR扩增的序列是环状的质粒,还是线性的质粒呢?那载体通用引物是什么呢?用它扩增的是哪段序列呢? 菌落PCR有带,可提取的质粒没带!请问我转化的单菌落做菌落PCR有带,单相对应的菌落提取质粒P不出带是什么原因呀?引物是特异性的! 菌落PCR和普通PCR区别 用革兰氏阳性菌做菌落PCR时,怎样处理菌体模板?如题,本人刚刚开始做分子生物学方面的研究,因为大家都知道G+的胞壁比G-菌比如E.coli的要厚些,所以要在PCR之前要对模板进行一定的处理,但是怎 菌落PCR的具体操作方法 分子克隆的时候,提出的质粒用菌落PCR是阳性的,但是酶切鉴定的时候却没有切出来目的条带,是怎么回事呢?