RT-PCR内参电泳跑不出来β-actin,退火温度57℃,45s扩增完之后DNA浓度大概600微末每毫升,跑完胶发现marker清晰,其他一片空白.实验室也没个明白人指点,让我做完实验赶紧回家过年……

为什么我的RT-PCR内参跑不出来.目的条带到是跑出来了 RT PCR为何都要跑电泳,在PCR的时候为何要加内参?是为了判断是否是PCR过程中出现问题?内参跑不出来而cDNA能跑出来是怎么回事,相反又是怎么回事? RT-PCR内参电泳跑不出来β-actin,退火温度57℃,45s扩增完之后DNA浓度大概600微末每毫升,跑完胶发现marker清晰,其他一片空白.实验室也没个明白人指点,让我做完实验赶紧回家过年…… 用RT-PCR检测目的基因表达差异,需将内参基因的电泳条带亮度调成一致.用RT-PCR检测目的基因表达差异,需将内参基因的电泳条带亮度调成一致,这个很费事,我一般是在一个管里配50ul的内参基因 RT-PCR电泳照片做RT-PCR跑电泳时,只在一个孔中单独加了内参,其他孔中分别加了marker和目的基因,这样的照片发表文章时行吗?看其他人的电泳照片内参的亮度都是一样的,我就只单独加了一个内 反转录RT-PCR的内参如何选择? RT-PCR是,内参是什么时候加入,作用是什么?谢谢 RNA跑胶多长时间才能把28S,18S和5S分开,我跑了大概30分钟,出来的是一条很亮的带,这样的RNA做RT-PCR内参能出结果,但是目的基因表达不出来,是因为RNA污染或降解吗,提取过程中我已经很注意了,以 我做的RT-PCR怎么样让内参一致?刚入门 老板让做内参的条件 反复做也没有要P出来的目的条带 我的退火温度是55 可以的 但是用这个条件去P 其他的样就P不出来 应该怎么办? PCR 内参 跑胶我跑半定量PCR的时候,内参出来的亮度不一致,有的 泳道很亮,有的暗一些,那我这张图还可以用吗,因为有人说内参的亮度应该保持一致?不是只要比目的基因和内参的灰度值来比较 pcr产物 跑胶及数据处理 1.同一个样本的目的和内参可以在同一块胶的不同上样孔里跑,这样出来的条带可以做灰度比值分析吧,但是,如果我目的和内参 在两块不同的胶上 并且两块胶 拍照时候 琼脂糖凝胶电泳用母液没有条带,而PCR扩增产物有条带,难道是母液的DNA浓度太低,电泳跑不出来? 做RT-PCR内参的作用是什么?应该如何选择管家基因啊? 做RT-PCR内参的作用是什么?应该如何选择管家基因 RT PCR只跑出内参的条带,没有目的基因,原因有哪些? 半定量RT-PCR电泳图如何分析 做实时定量PCR内参引物一般是扩增出来多大片段? 请问,GAPDH作为RT-PCR内参的原理是什么呀?我知道为什用它做内参了,就是不清楚怎么用它,